کلون سازی، تعیین توالی و بیان ژن آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی
Authors
abstract
سابقه و هدف: آنزیم l - آسپاراژیناز داروی موثر در درمان لوکمی لنفوبلاستیک و لنفومای غیرهوچکینی است. مهم ترین باکتری های مولد این آنزیم باکتری های اشریشیا کلی و گونه های مختلف اروینیا به ویژه اروینیا کریزانتمی می باشند.هدف از این پژوهش، ارزیابی آنزیم l-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی dsm 4610 بود. مواد و روش ها: در ابتدا dna ژنومی باکتری استخراج و پس از طراحی پرایمرهای اختصاصی echr asn f و echr asn r1 آزمون pcr انجام شد.در مرحله بعد، این ژن درون وکتورptz57r/t الحاق و به درون سلول میزبان اشریشا کلی dh5α وارد شد و پلاسمیدهای نوترکیب استخراج گردیدند. پس از تعیین توالی، نتایج توسط نرم افزارdnaman مورد بررسی قرار گرفت. با طراحی پرایمرهای بیانی، همسانه سازی در ناقل paed4 انجام شد و پس از تراریخت نمودن سلول های اشریشیا کلی bl21(de3) بیان پروتئین با روش sds-page ارزیابی شد. یافته ها: ژن جدا شده از سویه اروینیا کریزانتمی dsm4610 تفاوت های مشخصی با سایر ژن های مربوط به این آنزیم در بانک ژن داشت و با شماره دسترسی jf972567 در بانک ژن ثبت شد. بیشترین میزان بیان پروتئین پس از فرآیند بهینه سازی در شرایط. غلظت نیم میلی مولار iptg ، محیط کشت lb broth و دمای 37 درجه سانتیگراد حاصل گردید. الکتروفورز پروتئین روی ژل sds-page ، پروتئینی به وزن مولکولی تقریبا 5/37 کیلودالتون را نشان داد . نتیجه گیری: نتایج این پژوهش نشان داد که آنزیم l-آسپاراژیناز باکتری اروینیا کریزانتمی، شرایط مناسب برای مطالعات بیشتر به عنوان یک آنزیم ضدلوکمی را دارد.
similar resources
تعیین توالی ژن، کلونینگ و بیان آل- آسپاراژیناز نوترکیب از سودوموناس آیروجینوزا سویه SN4 در اشریشیاکلی
مقدمه: ال- آسپاراژیناز جایگاه با ارزشی از جنبه کاربردهای پزشکی و صنایع غذایی دارد. تقاضا برای این آنزیم دارویی هرساله چندین برابر میشود. مواد و روشها: در این پژوهش، یک آسپاراژیناز از سودوموناس ایروجینوزا سویه SN4، تعیین توالی و در اشریشیاکلی کلون شد. پرایمرها بر اساس آل- آسپاراژیناز از سودوموناس ایروجینوزا سویه DSM50071 طراحی شدند که بر اساس توالی ژن 16S rRNA شباهت بالایی را نسبت به سویه S...
full textکلون سازی و بیان سیتوپلاسمی l-آسپاراژیناز ii در باکتری اشریشیا کلی
سابقه و هدف: ال-آسپاراژیناز (تیپ ii) با فعالیت ضدتوموری به طور طبیعی توسط باکتری اشریشیا کلی تولید می گردد. این آنزیم با تبدیل ال- آسپاراژین موجود در خون به آمونیوم و آسپارتیک اسید، در درمان لوکمیای لمفوبلاستیک حاد (all) مورد استفاده قرار می گیرد. هدف از این پژوهش، تولید سیتوپلاسمی آنزیم ال- آسپاراژیناز ii و کلون سازی ژن آن بدون سیگنال پپتید و حذف متیونین ابتدایی بود. مواد و روش ها: در ابتدا ژن...
full textکلون سازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری
هورمون رشد باعث تحریک رشد و تکثیر سلولها در انسان و حیوانات میشود. این هورمون یک پلی پپتید تک زنجیرهای با 191 اسید آمینه است که در سلولهای سوماتوتروف واقع در بال جانبی غده هیپوفیز پیشین ساخته شده و ذخیره و ترشح میگردد. هدف از این تحقیق کلون سازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد لری بختیاری برای اولین بار در ایران میباشد. به منظور کلونسازی و تعیین توالی ژن هورمون رشد گوسفند نژاد ل...
full textجداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز باکتری ترموبیفیدا فوسکا
سابقه و هدف: آنزیم کوتیناز متعلق به خانواده سرین هیدرولازها است و به دلیل خواص ساختاری و عملکردی در حذف آلودگی های زیست محیطی اهمیت بسیار زیادی دارد. هدف از این پژوهش، جداسازی و کلون سازی ژن آنزیم کوتیناز از باکتری ترموبیفیدا فوسکا (Thermobifida fusca) بود. مواد و روشها: نمونه برداری از خاک های جنگلی شمال ایران صورت گرفت. با استفاده از محیط کشت اخت...
full textMy Resources
Save resource for easier access later
Journal title:
فصلنامه علمی پژوهشی دنیای میکروب هاPublisher: دانشگاه آزاد اسلامی واحد جهرم
ISSN 2008-3068
volume 3
issue شماره 1 (پیاپی 6) 2010
Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023